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化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)用途廣,具有非常高的靈敏度
瀏覽次數(shù):3104發(fā)布日期:2020-01-13
 
  
  化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)是現(xiàn)代微量分析方法之一,由于其靈敏度高(可達(dá)10-18mol)、簡便快速(計(jì)數(shù)1秒/管)、線性好(可兩點(diǎn)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線)、有效期長(可達(dá)1年)、安全無害(無放射性和致畸物污染)等優(yōu)點(diǎn)而成為取代放免和酶聯(lián)的重要技術(shù)。
  
  辣根過氧化酶使試劑中的發(fā)光物(luminol)氧化并發(fā)光,而試劑中含有增強(qiáng)劑這使得發(fā)光增強(qiáng)了1000倍。在免疫印跡中,將復(fù)雜的蛋白混合物經(jīng)sds-page分離,并轉(zhuǎn)移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫學(xué)檢測,經(jīng)HRP標(biāo)記的抗體與膜上的蛋白直接(標(biāo)記一抗)或間接(標(biāo)記二抗)反應(yīng)。
  
  在如今的Westernblot實(shí)驗(yàn)中,化學(xué)發(fā)光檢測是常用的檢測方法。相對(duì)于顯色檢測和熒光檢測而言,它的靈敏度非常高,可達(dá)到飛克級(jí)(fg)。自從增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光(ECL)檢測問世以來,這種方法就受到了*科研工作者的喜愛。
  
  化學(xué)發(fā)光檢測通常使用的是辣根過氧化物酶(HRP)。它催化底物魯米諾(luminol)的氧化,同時(shí)生成光信號(hào)。這些信號(hào)可通過X光膠片的曝光來檢測,或直接在與化學(xué)發(fā)光兼容的CCD成像系統(tǒng)上獲取圖像。當(dāng)然,后一種方式更方便,也更流行。
  
  用途:
  
  該底物試劑與堿性磷酸酶(ALP)混合后,堿性磷酸酶磷酸根水解后,底物立即發(fā)生分解反應(yīng)釋放出光子,在特定的堿性磷酸酶濃度范圍內(nèi),釋放的光子數(shù)量與溶液中堿性磷酸酶的濃度成正比,所以可以用于堿性磷酸酶的定量檢測。
  
  應(yīng)用領(lǐng)域:
  
  1堿性磷酸酶發(fā)光檢測;
  
  2.ELISA化學(xué)發(fā)光檢測;
  
  3.WB化學(xué)發(fā)光檢測;
  
  4.其他酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)檢測。
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